蛋白晶片 內容詳情
蛋白晶片發展前景
 蛋白晶片 2018-07-12 14:44:53

  蛋白晶片是一種高通量監測系統,通過靶分子和捕捉分子相互作用來監測蛋白分子之間的相互作用。捕獲分子一般都預固定在晶片表面,由於抗體的高度特異性和與抗原強結合特性所以被廣泛的用做捕獲分子。以下對蛋白晶片發展前景分析。

  蛋白質晶片,更確切是叫法是蛋白質微陣列,它的概念其實非常簡單,就是把多個蛋白質以陣列的形式固定在基片上。它的核心還是蛋白質本身,只是實現了多個蛋白質同時檢測(高通量),因此,效率調高了,工作減少了,用得樣本也減少了,一次實驗獲得的數據增多了。蛋白質晶片最關鍵的就一個詞就是「addressable」,可尋址,即對每個蛋白質打上一個位置標籤,這樣就能相互之間分辨,我想這就是理解蛋白質晶片最核心的一點。

  既然蛋白質晶片的本質還是蛋白,所以它的種類也是按照蛋白分類的,常見的有這幾種:第一種是抗體晶片,用來檢測樣本中的抗原,現在市面上常見的細胞因子抗體晶片、磷酸化抗體晶片;第二種是重組蛋白質晶片,這是我們公司主要的產品。我們有一款結核分枝桿菌的蛋白質晶片,一張晶片上涵蓋了所有的結核桿菌的蛋白質,一共4000多個。

  蛋白晶片技術的特點

  1、 反應快速,靈敏度高。反應環境為液相、微球上固定的探針與待檢樣品均在溶液中反應,其彼此間碰撞幾率與速度相對於固相晶片或ElISA等反應模式,可增加 1O倍以上,因此可提高反應速度及靈敏度。抗原一抗體等蛋白質分子相互作用的結果可在瞬間經雷射判定後由電腦以數據信息的形式記錄下來,敏感性顯著超越酶 聯信號或常規雜交信號檢測。

  2、通量大,可同時檢測多種目標物,所需成本較低,減少人力消耗,可對同一樣品中多達100種分子同時進行分析。液相晶片系統採用96孔板為反應容器,在35~60min內,可對96個不同的樣品進行檢測,所需樣品用量比常規方法少。

  3、可進行多元化分析,靈活性好,可適用於各種蛋白質分析,應用廣泛。通過對微球表面的修飾,可固定各種抗體或受體分子,從而滿足不同檢測和功能的研究需要。

  為了檢測晶片的應用,他們用不同螢光抗體分別標記能與蛋白G和FRB特異結合的IgG和FKBP12(12Kd FK506-binding protein)並作用於蛋白晶片,觀察這些蛋白質與蛋白晶片的相互作用,其結果清晰地顯示晶片上的蛋白G和單一的FRB點樣分別被標上藍色和紅色螢光。該實驗研究建立了蛋白質樣品微量點樣技術並使蛋白質固定於載體上時能夠保留原有的構象和生物學活性,這將為今後對蛋白質多樣品的並行研究或快速分析——為製備高通量功能檢測的蛋白晶片奠定了技術基礎。

  蛋白質晶片有很多的優勢,最突出的一點就是高通量,在一個反應中可以檢測成千上百的指標,而且每個指標之間基本上沒有相互干擾,這是其它檢測技術很難做到的。第二,微型化,所以樣本消耗量很少,對於比較珍貴的臨床樣本就是非常大的一個優勢;第三,靈敏度很高。蛋白質晶片上固定的蛋白,雖然量少,但是局部濃度很高,檢測樣本時有一個濃縮的效應,並且通過級聯放大和螢光檢測,可以現實高靈敏度檢測。第四,可以實現定量。在檢測時可設定標準曲線,這樣的可以做定量檢測,當然,這個需要標準品可獲得的前提下。以上對蛋白晶片發展前景分析。

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