在2025年的水楊酸行業，其應用領域廣泛，從植物生長調控到醫藥、化妝品行業都有涉及。但由於水楊酸在人體內會氧化為草酸引起中毒，所以對其準確測定關乎食品、藥品和化妝品的安全。目前，多種水楊酸測定方法不斷發展，各有優劣，在行業中發揮著不同作用。

  一、高效液相色譜法：水楊酸測定的主流手段

  《2025-2030年中國水楊酸行業重點企業發展分析及投資前景可行性評估報告》指出，高效液相色譜法是目前測定水楊酸最為常用的方法，憑藉檢測限低、靈敏度高的優勢，在複雜樣品測定中表現突出。在實際操作中，該方法結合不同檢測手段，並應用多樣化的前處理方法。

  在樣品溶液製備環節，溶劑提取法是常用方式。提取溶劑涵蓋甲醇、無水乙醇、乙腈、酸性混合溶劑等。由於水楊酸分子結構中鄰位羥基對羧基的特殊影響，在提取時加入適量甲酸、三氯乙酸、冰醋酸或磷酸等酸，能提升提取效率，降低水楊酸去質子化。初步提取後，可選擇直接過濾進樣，或進一步通過固相提取小柱等方式純化，以富集水楊酸，減少基質干擾。

  對照溶液製備時，通常用相應流動相溶解定容對照品，並進行超聲脫氣處理。高效液相色譜條件的選擇也至關重要。水楊酸具有紫外和螢光吸收特性，可採用 LC - UV、LC - DAD、LC - FLD、LC - MS 等檢測，檢測波長需依據流動相及基質干擾、儀器檢出限綜合確定。色譜柱固定相填料多為反相 C18 材料，規格常見為 4.6mm×150mm、4.6mm×250mm。流動相方面，研究表明，pH 值為 3 時分離效果較好，採用甲醇 - 0.02mol/L 磷酸二氫鉀溶液(V:V = 40:60)，並用磷酸調 pH 的流動相體系，分離效果最佳。

  液質聯用(LC - MS)技術的應用，進一步提升了檢測靈敏度。利用該技術，可在 12min 以內完成對飲料中包括水楊酸在內的 17 種酚酸的檢測，大大提高了分析效率。

  二、分光光度法：水楊酸測定的多樣化途徑

  分光光度法包含多種具體方法，為水楊酸測定提供了多樣化選擇。紫外分光光度法通過特定化學反應，使水楊酸生成具有特定吸收波長的絡合物，進而測定其含量。如用乙醚萃取飲料中的水楊酸，與乙酸銅在弱酸性條件下生成黃綠色絡合物，在 710nm 處測定吸光度;或用 0.01mol/L HCl 溶液提取阿司匹林咀嚼片中的游離水楊酸，測定其與 Fe³⁺反應產物的吸光度，回收率可達97.5% 。

  螢光分光光度法則利用水楊酸的螢光特性進行測定。先用三氯乙酸除去血清中的蛋白質，再用含 1% 乙酸的三氯甲烷提取水楊酸，通過螢光分光光度計檢測含量。此外，阻抑動力學光度法依據水楊酸在硫酸和磷酸介質中抑制碘離子催化亞砷酸還原錳的反應原理，用鄰聯甲苯中止反應後，根據溶液在 440nm 處的吸收測定潤膚露中水楊酸的含量。

  三、其他測定方法：水楊酸測定的補充與拓展

  流動注射分析法利用水楊酸和 Fe³⁺反應生成的紫色絡合物在 540nm 處有最大吸收的特性，採用硫酸鐵銨做載液，可測定乙醯水楊酸製劑中的水楊酸。離子色譜法基於水楊酸在鹼性條件下易電離成羧酸根離子的性質，利用高效離子色譜，以 0.22mol/L NaOH - H₂O - 50% 異丙醇組成流動相，0.025mol/L H₂SO₄溶液作為抑制劑，可測定腳癬水中的水楊酸。化學發光法根據在硫酸酸性溶液中高錳酸鉀氧化水楊酸產生化學發光反應，且乙二醛能增強發光強度的原理，可測定複方苯甲酸醇溶液中的水楊酸。

  四、水楊酸測定方法的現存問題與未來展望

  目前，雖然測定水楊酸的方法眾多，但每種方法都存在一定局限性。高效液相色譜法雖應用廣泛、靈敏度高，但在實際應用中，仍需致力於降低檢出限，並針對不同基質的樣品建立更有效的前處理方法，以消除複雜基質的干擾。鑑於水楊酸的毒性，建立一種檢出限低、線性範圍廣、重現性好的測定方法迫在眉睫。未來，水楊酸測定方法的研究需要科研人員不斷探索創新，綜合運用多種技術手段，優化現有方法，推動水楊酸測定技術的進一步發展，為保障食品、藥品和化妝品安全提供更可靠的技術支持。