腸道作為人體重要的消化與免疫器官,其內部棲息的微生物群落對人體健康起著關鍵作用。其中,擬桿菌和厚壁菌作為腸道優勢菌群,在食物殘渣分解代謝、維持腸道微生物動態平衡等方面意義重大。中醫藥在疾病治療過程中,與腸道菌群平衡調節密切相關,參苓白朮散作為經典健脾方劑,其含有的白朮等藥材成分,在調節腸道菌群方面備受關注。深入探究參苓白朮散多糖對腸道菌群的作用機制,有助於揭示中醫藥治療疾病的科學內涵,也為白朮在中醫藥領域的應用提供新視角。
參苓白朮散由多種中藥材組成,其中白朮是重要成分之一。《2025-2030年全球及中國白朮行業市場現狀調研及發展前景分析報告》指出,在2025年白朮行業競爭激烈的背景下,白朮質量對參苓白朮散功效影響顯著。實驗選用從正規渠道購買的參苓白朮散,其包含白扁豆 75g、茯苓 100g、蓮子 50g、薏苡仁 50g、白朮 100g 等多味藥材。實驗菌株選取多形擬桿菌、脆弱擬桿菌、厚壁菌 YT2、厚壁菌 T30 。同時,準備了厭氧菌 BHI 液體和固體培養基等多種試劑,以及 PCR 儀、厭氧工作站等專業儀器,為後續實驗奠定基礎。
採用水提醇沉法提取參苓白朮散中的多糖,隨後進行除蛋白、除色素及去除小分子物質等純化處理,並測定多糖含量。分別配製 MM 培養基、BHI 培養基和參苓白朮散多糖原溶液,將參苓白朮散多糖原溶液加入 MM 培養基配製成 20% 的多糖溶液,每份培養基體積為 10ml,經高溫高壓滅菌(120℃,20min)處理。對厚壁菌和擬桿菌進行 DNA 提取,利用 16S rRNA 基因引物進行 PCR 擴增,擴增產物純化測序後,在資料庫比對鑑定細菌。將四種組合的混合菌(多形擬桿菌 + 厚壁菌 YT2、多形擬桿菌 + 厚壁菌 T30、脆弱擬桿菌 + 厚壁菌 YT2、脆弱擬桿菌 + 厚壁菌 T30)分別接種於 BHI 培養基和參苓白朮散多糖培養基,初始接種量比例為 1∶1,在特定氣體環境(H₂ 10%、N₂ 80%、CO₂ 10%)下培養,每間隔 4h 取樣測定相關指標。通過梯度稀釋和平板塗布等方法,實現細菌 OD₆₀₀與細菌數量的換算。
經鑑定,實驗用厚壁菌 T30、厚壁菌 YT2、多形擬桿菌、脆弱擬桿菌與目的菌相似度均為 100%。通過革蘭氏染色可清晰區分擬桿菌和厚壁菌,並計算其數量比。換算得出 1 OD₆₀₀多形擬桿菌有 49×10⁸個細菌,1 OD₆₀₀脆弱擬桿菌有 126×10⁸個細菌等。在不同組合的混合菌培養實驗中,以參苓白朮散多糖為碳源時,多形擬桿菌在與厚壁菌 YT2 或 T30 混合培養時,最大細菌生長數值分別在 48h 達到(9.50±0.37)×10⁸CFU/ml 和 32h 達到(11.81±0.29)×10⁸CFU/ml;脆弱擬桿菌在與厚壁菌 YT2 或 T30 混合培養時,最大細菌生長數值分別在 44h 達到(27.96±1.40)×10⁸CFU/ml 和 32h 達到(27.16±1.01)×10⁸CFU/ml,二株擬桿菌的生長速度及最大細菌濃度均高於厚壁菌 YT2 和厚壁菌 T30。
參苓白朮散作為健脾名方,其功效與多糖成分調節菌群相關。實驗表明,在參苓白朮散多糖培養環境下,擬桿菌生長明顯優於厚壁菌,這意味著白朮等藥材組成的參苓白朮散中的多糖可作為競爭性碳源調節腸道菌群。此次研究雖通過體外混合菌競爭實驗揭示了中藥對微生態的部分影響,但對於相關細菌利用中藥多糖碳源的分子機制仍不明確。在2025年白朮行業競爭的大環境下,後續可結合更多前沿研究方法,進一步深入探究白朮在參苓白朮散中影響腸道微生態的作用機制,為白朮在中醫藥領域的應用開拓更廣闊的空間,也為中醫藥治療疾病提供更堅實的理論依據。